ELISA酶聯免疫吸附實驗原理：免疫分析是一種利用特定抗體與抗原或半抗原發生的高選擇性高特異性識別和結合原理，對待測抗體或者抗原進行分析測定的方法，酶聯免疫吸附分析（下稱ELISA）是免疫分析的一種，分三個部分組成：免疫識別，信號輸出和數據處理。
ELISA步驟：免疫識別是在聚苯乙烯制成的96孔板上包被抗體，而后利用抗體識別待測的抗原（通常是疾病的蛋白質生物標記物，病毒，細菌等等，從復雜待測液中將抗原吸附到96孔板表面。接著用帶有辣根過氧化酶（Horseradish Peroxidase, HRP）、熒光或放射性標記的抗體通過直接或者間接的方式輸出識別信號。最后利用信號強度，標準樣品濃度梯度等信息計算得出待測樣中目標抗原的濃度。
ELISA 法是免疫診斷中的一項新技術，現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定，根據已經使用的結果，認為 ELISA 法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩定及易于自動化操作等特點。不僅適用臨床標本的檢查，而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本, 因此，也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體，而且也可用于測定體液中的循環抗原，所以也是一種早期診斷的良好方法。
ELISA 試劑盒基本原理：
1、抗原或抗體能以物理性地吸附于固相載體表面，可能是蛋白和聚苯乙烯表面間的疏水性部分相互吸附，并保持其免疫學活性；
2、抗原或抗體可通過共價鍵與酶連接形成酶結合物，而此種酶結合物仍能保持其免疫學和酶學活性；
3、酶結合物與相應抗原或抗體結合后，可根據加入底物的顏色反應來判定是否有免疫反應的存在，而且顏色反應的深淺是與標本中相應抗原或抗體的量成正比例的，因此，可以按底物顯色的程度顯示試驗結果。
由于 ELISA 法一方面是建立在抗原與抗體免疫學反應的基礎上，因而，具有特異性。而另一方面又由于酶標記抗原或抗體是酶分子與抗原或抗體分子的結合物，它可以催化底物分子發生反應，產生放大作用，正因為此種放大作用而使本法具有很高的敏感性。因此，ELISA 法是一種既敏感又特異的方法。
ELISA 試劑盒的質量評估要素：
1、特異性
特異性簡單來說就是陰性樣本的陰性檢出率，要保證這一點首先就需要做到與其他檢測抗體（原）無交叉感染，并且保證陰性樣本檢出的準確性。
2、靈敏度
靈敏度簡單來說就是陽性樣本的陽性檢出率，一方面能夠反映出試劑盒對于被檢物質的最低檢測能力，另一方面需要保證陽性樣本檢出的準確性?？赏ㄟ^我們自身待檢物質的性質進行選擇，如果我們待檢物質濃度量很低，可以選擇高靈敏的試劑。
3、精密性
又可稱作重復性，一般而言，對于 ELISA 試劑盒而言，板間及板內精密性可控制在 15% 以內。有些 ELISA 試劑盒精密性可達到 10% 以內。
4、穩定性
穩定性是試劑盒必須有的基本屬性，是指試劑（盒）在有效期內和規定條件下保持其性能的能力，一般有效期穩定性、運輸穩定性、以及凍融穩定性。
5、操作簡便性
同樣對于 ELISA 的操作簡便程度大家也是非常關心的，操作時間以及操作步驟也是我們在選擇試劑盒過程中需要考慮的問題。
